Compreendendo os Testes para Doença de Lyme: Um Guia Completo do Paciente para o Diagnóstico

Índice

• Pontos-Chave
• Por que a Pesquisa sobre a Doença de Lyme é Importante
• A Bactéria por Trás da Doença de Lyme
• Dentro do Genoma: Características Incomuns
• As Muitas Espécies de Bactérias da Doença de Lyme
• Como a Bactéria Muda seu Revestimento
• O Espectro Completo da Doença de Lyme
• Diagnóstico Laboratorial: O Panorama Geral
• Cultivando as Bactérias: Técnicas de Cultura
• Quais Amostras de Pacientes Podem Ser Cultivadas
• Limitações Desta Pesquisa
• O Que Isso Significa para os Pacientes
• Perguntas Frequentes
• Informações da Fonte

Pontos-Chave

• A doença de Lyme é causada pela Borrelia burgdorferi, uma espiroqueta transmitida por carrapatos do gênero Ixodes, com cerca de 95% dos casos nos EUA em 12 estados.
• A cultura da bactéria é a prova mais forte de infecção ativa, mas leva até 12 semanas e requer meios especializados e microscopistas qualificados.
• O eritema migratório, a erupção cutânea expansiva de pelo menos 5 cm, aparece em pelo menos 80% dos pacientes com evidência objetiva e pode ser diagnosticado clinicamente.
• Até 10% dos pacientes com artrite de Lyme podem apresentar inflamação articular com duração de meses ou anos, apesar do uso de antibióticos, sendo mais comum com certas variantes dos genes HLA-DRB.
• Diferentes espécies de Borrelia causam doença na América do Norte, Europa e Ásia, levando a diferenças regionais nas manifestações tardias, como artrite ou ACA.

Por que a Pesquisa sobre a Doença de Lyme é Importante

A borreliose de Lyme (LB) — o nome médico da doença de Lyme — é transmitida por carrapatos do complexo Ixodes ricinus. Estes são os mesmos carrapatos de corpo duro, às vezes chamados de carrapatos do veado, que se alimentam de pessoas em áreas arborizadas. A doença foi descrita pela primeira vez como uma condição distinta nos Estados Unidos no final da década de 1970.

Desde 1982, quando o monitoramento de saúde pública começou, mais de 200.000 casos foram notificados aos Centros de Controle e Prevenção de Doenças (CDC) dos EUA. Entre 1998 e 2001, aproximadamente 17.000 casos foram notificados a cada ano. Em 2002, esse número subiu para 23.763 casos, resultando em uma incidência nacional de 8,2 casos por 100.000 pessoas.

Os casos estão altamente concentrados geograficamente. Cerca de 95% de todos os casos ocorrem em apenas 12 estados: Connecticut, Delaware, Maine, Maryland, Massachusetts, Minnesota, New Hampshire, Nova Jersey, Nova York, Pensilvânia, Rhode Island e Wisconsin. Esse agrupamento está localizado nas regiões nordeste, meio-atlântica e centro-norte do país.

A doença de Lyme não é um problema apenas da América do Norte. Ela está amplamente distribuída em países europeus e também ocorre no extremo leste da Rússia e em partes da Ásia. Como a doença é tão comum e geograficamente disseminada, a demanda por testes laboratoriais confiáveis é enorme. Somente nos Estados Unidos, estima-se que mais de 2,7 milhões de amostras de soro sejam testadas a cada ano para anticorpos contra B. burgdorferi.

Para atender a essa demanda, os laboratórios introduziram muitos testes diferentes. Alguns detectam a bactéria diretamente. Outros procuram os anticorpos do sistema imunológico usando lisados de células inteiras (material bacteriano fragmentado), antígenos recombinantes (proteínas produzidas em laboratório) ou antígenos peptídicos (fragmentos curtos de proteínas). Esses testes são ensaios imunoenzimáticos (EIA, um teste que usa uma mudança de cor para detectar uma reação). Esta revisão avalia como esses testes foram desenvolvidos e qual é o seu desempenho.

A Bactéria por Trás da Doença de Lyme

O agente causador, Borrelia burgdorferi, é uma espiroqueta — uma bactéria de forma helicoidal (semelhante a um saca-rolhas) com múltiplos endoflagelos (caudas internas semelhantes a chicotes que permitem que ela nade). As células são configuradas com 3 a 10 espirais frouxas e medem 10 a 30 micrômetros (µm) de comprimento e 0,2 a 0,5 µm de largura.

O organismo foi recuperado pela primeira vez em 1982 do carrapato vetor Ixodes dammini, agora renomeado Ixodes scapularis. Posteriormente, foi cultivado a partir de amostras de biópsia de pele, líquido cefalorraquidiano (LCR, o fluido que envolve o cérebro e a medula espinal) e amostras de sangue. Essas amostras vieram de pacientes tanto nos Estados Unidos quanto na Europa.

Organismos cultivados de B. burgdorferi são móveis e nadam quando colocados em lâminas recém-preparadas. Organismos vivos podem ser vistos usando microscopia de campo escuro ou de contraste de fase — técnicas que tornam objetos finos e transparentes visíveis sem coloração. Eles também podem ser reconhecidos sob um microscópio de luz padrão após coloração com corantes de prata, ou com métodos de microscopia fluorescente.

A estrutura da bactéria tem várias camadas. Sua ultraestrutura (anatomia interna fina) inclui:

• Uma camada superficial externa de limo (chamada camada S)
• Uma membrana externa trilaminar envolvendo o espaço periplasmático (o espaço entre as membranas interna e externa)
• 7 a 11 flagelos periplasmáticos dentro desse espaço
• Um compartimento mais interno chamado cilindro protoplasmático

Dentro do Genoma: Características Incomuns

B. burgdorferi foi a primeira espiroqueta a ter seu genoma completo (todo o seu conjunto de instruções genéticas) sequenciado. O genoma da cepa de referência, B. burgdorferi sensu stricto B31, totaliza 1.521.419 pares de bases (pb) — as "letras" individuais do código genético.

Esse total se divide em um cromossomo linear de 910.725 pb, com um conteúdo de G+C (uma medida da composição química do DNA) de 28,6%, além de 21 plasmídeos — 9 circulares e 12 lineares — com um tamanho combinado de 610.694 pb. Plasmídeos são pequenas alças ou fitas separadas de DNA que ficam fora do cromossomo principal.

Ao comparar esse genoma com o de uma espécie europeia relacionada, Borrelia garinii cepa PBi, os pesquisadores descobriram que a maior parte do cromossomo é conservada: 92,7% de identidade tanto na sequência de DNA quanto na de aminoácidos. O cromossomo mais dois plasmídeos lineares (lp54 e cp26), que carregam aproximadamente 860 genes, parecem formar o inventário genético básico de todas as espécies de Borrelia causadoras da doença de Lyme. Nem toda cepa de B. burgdorferi possui o conjunto completo de plasmídeos, portanto o tamanho total do genoma varia entre os isolados.

A análise do genoma revelou várias características incomuns entre as bactérias:

• Um cromossomo linear e múltiplos plasmídeos lineares e circulares
• Uma organização única dos genes de RNA ribossômico: um único gene de rRNA 16S (rrs) com genes de rRNA 23S (rrl) e 5S (rrf) repetidos em tandem
• Mais de 150 genes codificadores de lipoproteínas, representando 4,9% dos genes cromossômicos e 14,5% dos genes plasmidiais — significativamente mais alto do que qualquer outro genoma bacteriano sequenciado até aquele momento
• Uma fração substancial do DNA plasmidial que parece estar em um estado de decadência evolutiva
• Evidências de numerosos rearranjos de DNA, potencialmente recentes, entre os genes plasmidiais
• Ausência de genes reconhecíveis para a produção de aminoácidos, ácidos graxos, cofatores enzimáticos e nucleotídeos

A bactéria também não possui genes para as enzimas do ciclo do ácido tricarboxílico (parte da maquinaria de produção de energia da célula) e para compostos envolvidos no transporte de elétrons. Em conjunto, esses genes ausentes indicam que a B. burgdorferi é parasitária por natureza — ela depende de seu hospedeiro para muitos blocos de construção básicos, em vez de fabricá-los por conta própria.

As Muitas Espécies de Bactérias da Doença de Lyme

Onze espécies de Borrelia dentro do complexo B. burgdorferi sensu lato (o grupo mais amplo de bactérias relacionadas à doença de Lyme) foram descritas em todo o mundo. Elas não estão distribuídas de maneira uniforme.

• América do Norte: três espécies — B. burgdorferi sensu stricto, Borrelia andersonii e Borrelia bissettii
• Europa: cinco espécies — B. burgdorferi sensu stricto, B. garinii, Borrelia afzelii, Borrelia valaisiana e Borrelia lusitaniae
• Ásia (China, Japão, Coreia): sete espécies — B. garinii, B. afzelii, B. valaisiana, Borrelia japonica, Borrelia tanukii, Borrelia turdi e Borrelia sinica

Nem todas essas espécies causam doenças em pessoas. Na Europa, pelo menos três são conhecidas por serem patogênicas (causadoras de doenças) em humanos: B. burgdorferi sensu stricto, B. garinii e B. afzelii. Nos Estados Unidos, a B. burgdorferi sensu stricto é a única espécie conhecida por causar infecção em humanos.

Dentro da B. burgdorferi sensu stricto, os pesquisadores identificaram vários subtipos. Estudos associaram subtipos específicos à disseminação hematogênica (disseminação da bactéria pela corrente sanguínea) e à invasão tecidual em pacientes, bem como em animais infectados experimentalmente.

Na Ásia, apenas B. garinii e B. afzelii foram confirmadas definitivamente como patógenos humanos. Estudos em pacientes e animais de laboratório sugerem que B. bissettii, B. valaisiana e B. lusitaniae também podem ser capazes de causar doenças, mas sua capacidade de infectar humanos não está bem estabelecida.

Comparações genéticas mostram que essas espécies são intimamente relacionadas, com ordens de genes cromossômicos altamente conservadas e perfis plasmidiais semelhantes. Estudos mais recentes, no entanto, documentaram heterogeneidade genética significativa (variação) entre isolados tanto nos Estados Unidos quanto na Europa. Um grande número de sequências gênicas de B. burgdorferi sensu lato está agora disponível no GenBank, o banco de dados público mantido pelo National Center for Biotechnology Information, incluindo fla, vlsE, bmpA e dbpA, além de genes para rRNA 16S e proteínas de superfície externa A e C.

Como a Bactéria Muda sua Cobertura

B. burgdorferi sensu lato expressa diferentes proteínas de superfície dependendo de onde está vivendo — uma estratégia de sobrevivência para se adaptar a diferentes ambientes dentro de carrapatos e mamíferos. Isso é extremamente importante para o diagnóstico.

Quando a espiroqueta reside no intestino médio de carrapatos em jejum, ela exibe OspA, mas não OspC. Durante o repasto sanguíneo do carrapato, algumas espiroquetas param de produzir OspA e passam a produzir OspC. Outros genes são expressos apenas em um hospedeiro mamífero, ou são significativamente intensificados nele. Estes incluem as proteínas VlsE, DbpA, BBK32, Erp e Mlp.

Pesquisadores usaram microarranjos de genoma completo (ferramentas que medem a atividade de milhares de genes de uma só vez) para estudar a expressão gênica sob condições que imitam carrapatos em jejum, carrapatos alimentados e hospedeiros mamíferos. Em um experimento fundamental, B. burgdorferi B31 foi cultivada a 23°C e 35°C, simulando as temperaturas encontradas em vetores carrapatos e hospedeiros mamíferos, respectivamente. Um total de 215 quadros de leitura abertos (sequências gênicas) foram expressos diferencialmente nas duas temperaturas. Surpreendentemente, 136 destes — 63% — estavam localizados em plasmídeos. Esse achado destaca a importância dos genes transportados por plasmídeos para a adaptação a diferentes ambientes.

A diversidade genética e a expressão gênica diferencial têm consequências diretas para os testes laboratoriais. A escolha dos primers de PCR (sequências curtas de DNA usadas para detectar material genético bacteriano) pode ter como alvo diferentes segmentos do genoma. A seleção de antígenos específicos para testes de anticorpos também pode alterar a sensibilidade e a especificidade de um ensaio diagnóstico.

O Espectro Completo da Doença de Lyme

A infecção por B. burgdorferi sensu lato pode produzir distúrbios cutâneos, neurológicos, cardíacos e musculoesqueléticos. O quadro clínico básico é semelhante em todo o mundo, mas existem diferenças bem documentadas entre a Europa e a América do Norte. Essas diferenças são atribuídas às diferentes espécies bacterianas que causam a doença em cada continente e, mesmo dentro da Europa, os padrões variam por região, dependendo de qual espécie é dominante.

A infecção precoce geralmente começa com eritema migratório (EM) localizado — a erupção cutânea vermelha em expansão, frequentemente chamada de erupção em "olho de boi". Em dias ou semanas, pode ser seguida por evidência clínica de infecção disseminada afetando a pele, o sistema nervoso, o coração ou as articulações. Meses depois, a infecção tardia pode aparecer.

O EM é o sinal característico da infecção precoce e a marca clínica da doença de Lyme. Em séries recentes, é reconhecido em pelo menos 80% dos pacientes que apresentam evidência clínica objetiva de infecção que atende à definição de vigilância do CDC. A erupção começa no local da picada do carrapato como uma mácula ou pápula vermelha (uma mancha plana ou levemente elevada), aumenta rapidamente e, às vezes, desenvolve clareamento central.

O diagnóstico clínico da doença de Lyme precoce com EM depende do reconhecimento da aparência característica de uma lesão cutânea com pelo menos 5 cm de diâmetro. Nesta fase, os pacientes podem não apresentar nenhum sintoma. Mais comumente nos Estados Unidos, os pacientes podem apresentar sintomas semelhantes aos da gripe, como cefaleia, mialgia (dores musculares), artralgias (dor nas articulações) ou febre.

Alguns investigadores tratam a combinação de sintomas constitucionais mais EM como evidência de disseminação, mas os autores observam que isso não é baseado em evidências. Eles preferem chamar essa apresentação de "EM sintomático".

A disseminação hematogênica (disseminação pela corrente sanguínea) pode atingir o sistema nervoso, as articulações, o coração ou outras áreas da pele. Ocasionalmente, a disseminação hematogênica atinge outros órgãos e pode produzir uma ampla gama de manifestações precoces da doença de Lyme. Pacientes com evidência objetiva de disseminação geralmente apresentam uma ou mais das seguintes síndromes:

• Múltiplas lesões de EM
• Defeitos de condução atrioventricular (sinalização elétrica interrompida no coração)
• Miopericardite (inflamação do músculo cardíaco e do saco circundante)
• Artrite
• Paralisia facial (fraqueza do nervo facial)
• Meningite (inflamação das membranas ao redor do cérebro e da medula espinal)
• Meningoradiculoneurite, também conhecida como síndrome de Bannwarth (inflamação da raiz nervosa)

A doença de Lyme tardia pode se desenvolver em alguns pacientes não tratados, meses a alguns anos após a infecção transmitida por carrapato. Suas principais manifestações são artrite, neuroborreliose tardia (neuropatia periférica ou encefalomielite — dano nervoso ou inflamação do cérebro e da medula espinal) e acrodermatite crônica atrófica (ACA, uma condição cutânea lentamente progressiva).

A artrite de Lyme começa como ataques intermitentes de artrite mono ou pauciarticular (afetando uma ou poucas articulações), especialmente grandes articulações. Em até 10% dos pacientes, a artrite pode persistir por meses ou alguns anos, apesar do tratamento com antimicrobianos (antibióticos e medicamentos relacionados). A artrite resistente ao tratamento é observada com mais frequência em pacientes com certos alelos HLA DRB (variantes genéticas herdadas do sistema imunológico). Pesquisadores sugeriram que a autoimunidade — o sistema imunológico atacando os próprios tecidos do corpo — desempenha um papel nessa forma.

O local onde o paciente vive determina a forma da doença tardia. A artrite de Lyme é a manifestação tardia mais comum na América do Norte, enquanto a acrodermatite crônica atrófica parece ser a manifestação tardia mais comum na Europa. Novamente, essas diferenças provavelmente se devem às diferentes espécies bacterianas que causam a infecção em cada continente.

Diagnóstico Laboratorial: O Panorama Geral

Uma variedade de técnicas laboratoriais foi desenvolvida para a detecção direta de B. burgdorferi sensu lato. Esses ensaios fornecem evidências de espiroquetas intactas, ou de componentes das espiroquetas, como DNA ou proteínas, em vetores carrapatos, hospedeiros reservatórios (animais que carregam a bactéria na natureza) ou pacientes.

Quatro abordagens diferentes têm sido utilizadas no laboratório clínico:

1. Ensaios baseados em microscopia
2. Detecção de proteínas específicas de B. burgdorferi
3. Detecção de ácidos nucleicos (DNA) específicos de B. burgdorferi
4. Cultura (cultivo do organismo)

Dentre essas, a cultura de B. burgdorferi sensu lato oferece, sem dúvida, a melhor confirmação de infecção ativa, e tem sido cada vez mais utilizada como ferramenta diagnóstica por pesquisadores em ambos os lados do Atlântico. O cultivo do organismo também permite que os cientistas estudem as propriedades estruturais, moleculares, antigênicas e causadoras de doenças das diferentes espécies.

A detecção microscópica direta da bactéria tem utilidade clínica limitada para confirmar a borreliose de Lyme, porque os organismos são muito escassos nas amostras clínicas. Os ensaios de detecção de antígenos, exceto a PCR, sofrem do mesmo problema. Os testes de captura de antígenos têm sido usados para detectar antígenos bacterianos no líquido cefalorraquidiano de pacientes com neuroborreliose. Esses testes também têm sido usados em amostras de urina de pacientes com suspeita de borreliose de Lyme, mas sua confiabilidade é baixa ou, na melhor das hipóteses, questionável.

Cultivando as Bactérias: Técnicas de Cultura

Os meios líquidos (soluções nutritivas) usados hoje para cultivar B. burgdorferi sensu lato foram derivados do meio de Kelly original por meio de uma série de modificações ao longo do tempo. As versões atuais incluem:

• Meio Barbour-Stoenner-Kelly II (BSK II) — utiliza CMRL-1066 sem glutamina, mais Yeastolate, neopeptona como preparação de peptona e HEPES como tampão
• BSK-H — omite gelatina e utiliza proporções diferentes de certos ingredientes
• Meio de Kelly Preac-Mursic (MKP) — remove Yeastolate e utiliza proporções diferentes de certos ingredientes; também chamado de modificação de Pettenkofer
• Modificação de Stoerner — adiciona Yeastolate e CMRL-1066, sem glutamina e sem bicarbonato de sódio

Esses meios modernos suportam o crescimento melhor do que as versões mais antigas. Eles permitem a recuperação a partir de inóculos baixos (pequenos números iniciais de bactérias), produzem tempos de geração mais curtos e atingem concentrações máximas de espiroquetas de cerca de 10⁸ a 10⁹ organismos por mililitro.

Os ingredientes-chave do BSK II incluem CMRL-1066, um meio padrão usado para o cultivo de células de mamíferos. Outros ingredientes incluem albumina sérica bovina fração V, uma fonte rica de proteínas que também estabiliza o pH, e N-acetilglucosamina, um bloco de construção para a parede celular bacteriana. O BSK II também inclui soro de coelho, citrato, piruvato e muitos outros componentes. A capacidade de promoção do crescimento desses meios depende da seleção cuidadosa dos ingredientes-chave, que podem variar amplamente em composição.

As condições de incubação também são importantes. Temperaturas de 39°C (cerca de 102°F) ou mais podem reduzir ou impedir o crescimento. As culturas são incubadas por até 12 semanas — muito mais tempo do que o necessário para a maioria dos outros patógenos bacterianos humanos. Essa longa espera reflete o tempo de geração prolongado da espiroqueta de 7 a 20 horas ou mais durante o crescimento em fase logarítmica.

Os laboratórios detectam o crescimento examinando periodicamente uma amostra do fluido de cultura em busca de espiroquetas. Os laboratórios usam microscopia de campo escuro ou microscopia de fluorescência após coloração com corante laranja de acridina ou um anticorpo fluorescente específico. Quaisquer estruturas semelhantes a espiroquetas observadas devem ser confirmadas como B. burgdorferi sensu lato, seja demonstrando reatividade com anticorpos monoclonais específicos (proteínas imunes idênticas, fabricadas em laboratório) ou detectando sequências de DNA específicas usando PCR.

A experiência é importante aqui. A falta de familiaridade com a detecção microscópica de B. burgdorferi sensu lato pode levar a leituras falso-positivas, porque outras estruturas, como restos celulares, podem parecer filamentosas e ser confundidas com a bactéria.

O organismo também pode ser cultivado em meios sólidos, com adição de agarose para solidificar o meio líquido, e incubado sob condições microaerófilas (baixo oxigênio) ou anaeróbias (sem oxigênio). Uma vantagem dos meios sólidos é que colônias individuais podem ser identificadas, permitindo que os pesquisadores isolem cepas clonais específicas.

Cepas de B. burgdorferi sensu lato propagadas em laboratório também podem ser cocultivadas (cultivadas em conjunto) com linhagens celulares de carrapatos e com certas linhagens celulares de mamíferos. Essas técnicas de cocultivo podem ser úteis para o isolamento primário da bactéria diretamente de amostras clínicas.

Quais Amostras de Pacientes Podem Ser Cultivadas

B. burgdorferi sensu lato pode ser recuperada de uma variedade de tecidos e fluidos corporais de pacientes com borreliose de Lyme. Estes incluem:

• Amostras de biópsia e lavagem de lesões cutâneas de EM
• Amostras de biópsia de lesões cutâneas de ACA
• Amostras de biópsia de lesões cutâneas de linfocitoma borrelial (um nódulo cutâneo raro e benigno associado à borreliose de Lyme)
• Líquido cefalorraquidiano
• Sangue

Essa variedade de tipos possíveis de amostra é importante, porque significa que a recuperação do organismo depende muito de qual tecido é amostrado e em que estágio da doença. A revisão científica original continua a partir deste ponto com discussões detalhadas sobre métodos de detecção molecular. Esses métodos incluem PCR e PCR quantitativo em tempo real. A revisão também aborda o diagnóstico imunológico. Também aborda métodos de detecção de anticorpos, como ensaios de imunofluorescência. A revisão também discute ensaios imunoenzimáticos, imunoblotting Western, teste em duas etapas e testes mais recentes usando antígenos recombinantes e peptídicos. Abrange ainda ensaios de anticorpos borreliacidas, detecção de anticorpos ligados a imunocomplexos circulantes, teste de anticorpos no líquido cefalorraquidiano e testes de resposta imune celular.

Limitações Desta Pesquisa

Esta revisão descreve o estado dos testes diagnósticos em 2005, portanto as tecnologias discutidas — e os números de desempenho citados — refletem o que estava disponível naquela época. Métodos mais recentes entraram no laboratório desde então.

Várias limitações perpassam todo o campo. A detecção microscópica direta é limitada pela pequena quantidade de organismos presentes nas amostras dos pacientes. Os testes de detecção de antígenos fora do PCR têm confiabilidade ruim ou questionável. A cultura, embora seja a confirmação mais forte de infecção ativa, requer até 12 semanas, necessita de meios especializados e microscopistas qualificados, e pode produzir leituras falso-positivas quando a equipe não tem experiência. Até mesmo o genoma bacteriano varia entre as cepas. A expressão gênica muda dependendo se o organismo está em um carrapato ou em um mamífero — fatores que podem alterar o desempenho de um determinado teste diagnóstico.

A revisão também observa áreas onde o conhecimento permanece incerto. A capacidade de B. bissettii, B. valaisiana e B. lusitaniae de causar doença humana não está bem estabelecida. E a ideia de que sintomas constitucionais juntamente com EM comprovam que a infecção se disseminou é descrita pelos autores como não baseada em evidências.

O Que Isso Significa para os Pacientes

Você pode morar no nordeste, meio-Atlântico ou centro-norte dos Estados Unidos. Você pode ter viajado para essas regiões. Você também pode morar ou ter viajado para a Europa ou partes da Ásia onde a borreliose de Lyme ocorre. Compreender o quadro diagnóstico pode ajudar. Compreender o quadro diagnóstico pode ajudá-lo a ter uma conversa melhor com seu médico.

1. Conheça a erupção cutânea. O eritema migratório aparece em pelo menos 80% dos pacientes com evidência objetiva de borreliose de Lyme. Uma lesão cutânea de pelo menos 5 cm que aumenta ao longo de dias é o sinal clássico e pode ser diagnosticada clinicamente, sem um teste laboratorial.
2. Espere primeiro um diagnóstico clínico. Quando a erupção cutânea característica está presente, os médicos muitas vezes podem diagnosticar a borreliose de Lyme precoce apenas pela sua aparência.
3. Entenda que a cultura leva tempo. Cultivar a bactéria é a prova mais forte de infecção ativa, mas as culturas são mantidas por até 12 semanas porque o organismo se divide lentamente — aproximadamente a cada 7 a 20 horas.
4. Pergunte qual amostra está sendo testada. A bactéria é encontrada em diferentes locais do corpo em diferentes estágios — biópsias de pele de lesões de EM, ACA ou linfocitoma, líquido cefalorraquidiano e sangue. A amostra correta depende dos seus sintomas.
5. Pergunte sobre as limitações do teste. A microscopia e os testes de antígeno não baseados em PCR podem não detectar o organismo ou produzir resultados não confiáveis, e a leitura de culturas requer experiência para evitar falsos positivos.
6. Relate sintomas articulares persistentes. Até 10% dos pacientes com artrite de Lyme podem apresentar inflamação articular que dura meses ou anos apesar do tratamento com antibióticos. Isso é mais comum em pessoas com certas variantes herdadas dos genes HLA-DRB.

O ponto principal: a doença de Lyme é comum, geograficamente concentrada e causada por um organismo geneticamente complexo que altera suas proteínas de superfície à medida que se move entre carrapatos e humanos. Essa complexidade é exatamente o motivo pelo qual nenhum teste laboratorial isolado é perfeito, e por que o diagnóstico ainda depende da combinação de seus sintomas, seu histórico de exposição e resultados laboratoriais cuidadosamente selecionados.

Perguntas Frequentes

Qual é a forma mais confiável de confirmar uma infecção ativa por Lyme?

O cultivo da bactéria em cultura é a prova mais forte de infecção ativa. No entanto, é lento e tecnicamente exigente, necessitando de até 12 semanas porque o organismo se divide aproximadamente a cada 7 a 20 horas. Também requer meios especializados e microscopistas qualificados para evitar leituras falso-positivas.

Quanto tempo leva uma cultura de Lyme e por quê?

As culturas são mantidas por até 12 semanas. Essa longa espera ocorre porque a bactéria tem um tempo de geração prolongado de 7 a 20 horas ou mais durante a fase de crescimento logarítmico. Os laboratórios verificam periodicamente o crescimento usando microscopia de campo escuro ou de fluorescência, e quaisquer estruturas semelhantes a espiroquetas devem ser confirmadas com anticorpos específicos ou testes de DNA.

Quais amostras corporais podem ser testadas para a bactéria da Lyme?

A bactéria pode ser recuperada de vários tecidos e fluidos: biópsias de pele de lesões de eritema migratório, acrodermatite crônica atrófica ou linfocitoma borrelial; líquido cefalorraquidiano; e sangue. A amostra correta depende dos seus sintomas e do estágio da doença, porque o organismo é encontrado em diferentes locais do corpo em momentos diferentes.

Posso ser diagnosticado com doença de Lyme sem um exame laboratorial?

Sim. Quando a erupção cutânea característica de eritema migratório está presente, os médicos muitas vezes podem diagnosticar a doença de Lyme precoce apenas pela sua aparência. A erupção aparece em pelo menos 80% dos pacientes com evidência objetiva de infecção, e uma lesão de pele de pelo menos 5 cm que aumenta ao longo de dias é o sinal clássico.

O que significa se minha artrite de Lyme não melhorar com antibióticos?

Até 10% dos pacientes com artrite de Lyme podem apresentar inflamação articular que dura meses ou anos apesar do tratamento com antibióticos. Essa forma resistente ao tratamento é observada com mais frequência em pessoas com certas variantes herdadas dos genes HLA-DRB, e pesquisadores sugeriram que a autoimunidade desempenha um papel nesse tipo de artrite.

Por que os sintomas da doença de Lyme diferem entre a América do Norte e a Europa?

Diferentes espécies de Borrelia causam infecção em cada continente. Na América do Norte, a B. burgdorferi sensu stricto é a única espécie conhecida por causar infecção humana, e a artrite de Lyme é a manifestação tardia mais comum. Na Europa, três espécies são patogênicas, e a acrodermatite crônica atrófica é a manifestação tardia mais comum.

Os testes de antígeno ou a microscopia são confiáveis para diagnosticar a doença de Lyme?

A detecção microscópica direta tem utilidade clínica limitada porque os organismos são escassos em amostras clínicas. Os ensaios de detecção de antígeno que não sejam PCR sofrem do mesmo problema. Os testes de captura de antígeno usados no líquido cefalorraquidiano ou na urina têm confiabilidade ruim ou questionável. A cultura continua sendo a confirmação mais forte de infecção ativa, embora seja lenta e tecnicamente exigente.

Tenho sorologia negativa para Lyme, mas sintomas articulares e cardíacos contínuos — quando devo buscar uma segunda opinião sobre meu diagnóstico de doença de Lyme?

Um teste de anticorpos negativo não descarta a doença de Lyme, porque o desempenho do teste varia conforme a espécie bacteriana, os antígenos escolhidos e o estágio da doença. A cultura da bactéria pode confirmar infecção ativa, mas leva até 12 semanas, requer meios especializados e microscopistas qualificados, funciona apenas em pacientes não tratados e é muito insensível na doença fora da pele, como no envolvimento articular ou cardíaco. Se seus sintomas persistirem apesar de um resultado negativo, ou se a inflamação articular durar meses após os antibióticos, uma revisão independente pode ajudar a esclarecer o quadro. Uma revisão independente de seu histórico de exposição, sintomas e resultados laboratoriais pode ajudar a esclarecer o quadro. A Diagnostic Detectives Network fornece segundas opiniões independentes de especialistas.

Informações da Fonte

Original article title: Diagnosis of Lyme Borreliosis

Publication details: Clinical Microbiology Reviews, July 2005, Volume 18, Number 3, pages 484–509. Copyright © 2005, American Society for Microbiology. DOI: 10.1128/CMR.18.3.484–509.2005.

Este artigo voltado para pacientes é baseado em pesquisas revisadas por pares.