实现雌激素检测的超高灵敏度：为激素水平较低的特殊人群提供准确测量的指南

目录

• 要点
• 为何雌激素测量至关重要
• 雌激素在体内的代谢过程
• 特殊挑战：雌激素水平极低的人群
• 金标准方法：液相色谱-质谱法
• 样本制备：为分析做好准备
• 衍生化：通过化学方法提升灵敏度
• 色谱分离：区分相似分子
• 基质效应：隐藏的干扰问题
• 临床意义：这对患者意味着什么
• 当前方法的局限性
• 对研究人员和临床医生的建议
• 常见问题解答
• 信息来源

要点

• 较旧的雌激素免疫测定常因与相似分子发生交叉反应而导致读数不准确。
• 结合液相色谱-质谱法的现代稳定同位素稀释法是雌激素测量的金标准。
• 在绝经后女性和老年男性中，雌激素水平通常低于5 pg/mL，需要超灵敏的检测方法。
• 一种使用NMPS衍生化的方法仅需0.1 mL血清即可高灵敏度地测量五种雌激素。
• 实验室用品（如玻璃试管）造成的污染可能会虚假升高雌激素结果，必须进行检查。

为什么测量雌激素很重要

雌激素测量是现代内分泌学的基石。它在许多内分泌（激素相关）疾病的临床评估中起着关键作用，也在研究激素如何影响人类生物学和疾病方面发挥重要作用。近30年来，科学家和临床医生一直依赖传统的放射免疫测定（RIA）或直接酶免疫测定来测量循环雌激素水平。

这些较旧的方法具有良好的灵敏度，但存在一个严重缺点：缺乏特异性。免疫测定中使用的抗体经常与其他类固醇（化学结构与雌激素相似的分子）发生交叉反应，导致读数不准确。这种交叉反应在解释流行病学研究数据时造成了重大问题，且结果在不同实验室之间经常存在差异。

基于免疫测定的方法的另一个主要限制是它们一次只能测量一种分析物。为了测量单一雌激素的所有代谢物（分解产物），研究人员必须进行多次单独的测定，这既耗时又低效。然而，在过去十年中，稳定同位素稀释（SID）结合液相色谱-选择反应监测-质谱法（LC-SRM/MS）技术的显著进步为解决这些问题提供了强有力的方案。

然而，即使拥有这种先进技术，仍面临一个令人望而生畏的挑战：量化雌激素水平极低的人群的血清和血浆样本中的雌激素及其代谢物。这包括老年男性、儿童、绝经后女性以及接受芳香化酶抑制剂治疗乳腺癌的女性。本综述由宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院和北京辐射医学研究所的研究人员撰写，探讨了利用超高灵敏度SID LC-SRM/MS方法处理这些具有挑战性样本所涉及的特殊问题，并建议在分析过程的每一步遵循最佳实践。

雌激素在体内的代谢过程

了解雌激素在体内的行为有助于解释为什么测量它们如此重要。多项临床和实验研究表明，女性血液中相对较高的雌激素水平与乳腺癌、子宫内膜癌和卵巢癌风险增加有关——尽管值得注意的是，其中许多研究使用了有效性存疑的RIA测定。在男性中，循环雌激素水平升高也是前列腺癌的潜在危险因素。

准确测量儿童体内的雌二醇（E2）和睾酮（T）已被证明对诊断和治疗青春期和性发育障碍至关重要。一些研究还表明，较早年龄较高的雌激素水平与女孩乳房发育的开始相关，这表明发育期间的激素可能会调节晚年的疾病风险。

雌激素通过两条主要途径发挥作用：雌激素受体（ER）依赖性机制和ER非依赖性机制。ER依赖性途径涉及对异常细胞增殖的直接刺激，这与乳腺癌的发生有因果关系。ER非依赖性致癌作用被认为是由具有基因毒性（或DNA损伤性）的雌激素代谢物引起的。

该过程的工作原理如下：

1. 母体雌激素通过细胞色素P450（CYP）1B1和CYP3A4酶进行氧化代谢（酶的化学修饰）。
2. 这一过程形成两类儿茶酚（具有两个相邻羟基的化学结构）雌激素代谢物：2,3-儿茶酚（2-OH-E1和2-OH-E2）和3,4-儿茶酚（4-OH-E1和4-OH-E2）。
3. CYP1B1表现出显著的区域选择性——对形成4-OH-E1和4-OH-E2的偏好比为9:1，相对于2-羟基化形式。
4. 研究表明，4-OH-E1和4-OH-E2比相应的2-OH-E1和2-OH-E2代谢物更具基因毒性（对DNA造成损害）。

有趣的是，并非所有雌激素代谢物都是有害的。2-OH-E2是芳香化酶（将雄激素转化为雌激素的酶）的有效抑制剂，而2-OH-E1在调整循环雌酮（E1）浓度后，与绝经后女性雌激素受体阳性（ER+）乳腺癌风险降低相关。这两种儿茶酚都会被一种称为儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）的酶迅速转化为甲氧基（OMe）代谢物。值得注意的是，2-OMe-E2具有显著的抗增殖活性，意味着它有助于防止细胞不受控制地增殖。

雌激素及其羟基化代谢物也容易被添加葡萄糖醛酸、硫酸盐或谷胱甘肽（GSH）基团修饰，形成结合型雌激素代谢物。循环中最丰富的雌激素结合物是硫酸盐，它们可以通过类固醇硫酸酯酶的作用在乳腺组织中作为雌激素前体。绝经后女性中，循环雄激素也可以通过芳香化酶的作用作为雌激素前体——这与绝经前女性的雌激素来源根本不同。

由于这些不同的效应和代谢途径，血液中的雌激素及其代谢物是组织雌激素生物合成和代谢的有价值生物标志物——生物学指标。

特殊挑战：雌激素水平极低的人群

对于大多数处于生育年龄的成年人来说，其雌激素水平足够高，可以用常规技术进行测量。但某些群体的雌激素水平异常低，给分析带来了严峻的挑战。

绝经后女性和老年男性的未结合E2典型血清浓度通常低于5 pg/mL（皮克每毫升——1皮克为1万亿分之一克）。相比之下，这些群体中未结合E1的水平范围为11.8至37.4 pg/mL。在儿科内分泌学临床研究中，E2水平据报道约为成人的100倍低，最低水平出现在青春期前阶段。

这些低pg/mL水平的测量对大多数基于液相色谱-质谱（LC-MS）的检测方法来说极具挑战性。更糟糕的是，其他未结合的雌激素代谢物——如甲氧基雌激素（MeO-estrogens）或儿茶酚类物质——其浓度更低，通常低于大多数常规LC-MS检测方法的定量下限（LLOQ，即可靠测量的最小量）。

灵敏度挑战主要源于未结合雌激素及其代谢物在电离效率方面的不足——这意味着它们难以获得质谱法检测所需的电荷。这就是科学家开发了多种衍生化策略（化学修饰）以提高电离效率和灵敏度的原因。这些策略通常还有助于样品净化。

实际上，在水解或溶剂解（使用水或酒精进行的化学分解）后测量总雌激素（未结合形式加上结合形式）更容易，因为总雌激素水平至少是未结合雌激素水平的2–3倍高。然而，评估不同样品间水解的效率和均匀性仍然存在问题，可能导致错误结果，因为并非所有雌激素结合物都有可用的真实标准品和稳定同位素标准品。

金标准方法：液相色谱-质谱法

稳定同位素稀释（SID）方法与液相色谱-选择反应监测-质谱法（LC-SRM/MS）相结合，现在被广泛接受为血清和血浆中雌激素及其代谢物定量的“金标准”。与免疫测定相比，这种方法提供了更高的特异性、高准确度以及同时监测多种雌激素的能力。

其原理如下：研究人员向患者样本中加入已知数量的每种雌激素的“重”（同位素标记）版本。由于标记和未标记的版本在提取和分析过程中行为一致，研究人员可以通过比较两个信号来计算存在的天然雌激素的确切量。这种自我校正的方法消除了困扰旧方法的许多错误。

当雌激素分子转化为“预电离”衍生物（已带有电荷的化学修饰形式），并使用三重四极杆质谱仪在选择反应监测（SRM）模式下进行分析，并耦合纳流液相色谱（一种使用极低流速的技术）时，可以实现超高性能。

两项开创性方法展示了这种方法的力量：

• 2011年 — Girard P (GP) 衍生化方法：用于分析E1及其代谢物。允许研究人员仅使用0.5 mL血清。每种雌激素的定量下限为0.156 pg/mL（柱上15.6飞克 [fg]）——1飞克为1千万亿分之一克。
• 2015年 — N-甲基吡啶-3-磺酰基 (NMPS) 衍生化方法：用于E2及其代谢物。仅需0.1 mL血清——即一滴——却实现了令人惊叹的柱上1.0 fg灵敏度，适用于五种雌激素及其代谢物。

样品制备：为分析做准备

在进行任何雌激素测量之前，必须对样品进行制备。这通常涉及提取（将雌激素与其他血液成分分离）、净化和浓缩。处理结合雌激素主要有两种方法：可以在分析前通过水解将其分解为未结合形式，或者作为完整的结合物进行测量。

水解将结合物转化为未结合形式，从而增加样品中的浓度。水解后，液-液提取（LLE）或固相萃取（SPE）可以高效地从血清和血浆中提取雌激素。

液-液提取 (LLE)：LLE成本低廉、快速，通常是雌激素分析的主要提取方法。其缺点包括劳动密集、耗时，且比SPE更难自动化。最常用的溶剂是甲基叔丁基醚（MTBE）、乙醚、二氯甲烷或有机溶剂混合物。MTBE可以提取血清中的未结合雌激素以及衍生化缓冲液中的雌激素衍生物。

Keski-Rahkonen及其同事进行的一项彻底调查比较了从血清样品中提取MTBE、乙醚、己烷和2-甲基丁烷的提取效率。该研究表明，使用MTBE的LLE完全回收了测试的类固醇激素，与其他溶剂相比，使其成为首选方法。

固相萃取 (SPE)：离线或在线SPE耦合LC-MS是一种非常有前景的半自动样品分析技术。在线SPE的优点包括更短的分析时间、更浓缩的色谱带以及大大降低的污染风险。

Zhao及其同事的一项著名研究报道了一种用于测定血液和尿液中12种未结合雌激素及其完整结合物的LC-MS方法。该方法仅使用一步SPE处理未结合雌激素及其结合物：将样品加载到Oasis HLB（亲水-亲脂平衡）固相萃取柱后，首先用乙酸乙酯洗脱未结合雌激素，然后用含0.1%氢氧化铵的甲醇洗脱结合物。

最近的一项研究报告了一种使用弱阳离子交换（WCX）限制.access材料（RAM）捕获柱的自动化在线捕获-洗脱过程，并带有在线稀释功能。这种方法显示出用于老年男性、儿童和绝经前女性样本的潜力，因为简化的流程仅需100 μL血清，达到3 pg/mL的定量下限（LLOQ），并提供出色的准确度和精密度。

结合型雌激素的两种方法：

第一种方法涉及在提取和衍生化之前水解β-葡萄糖醛酸苷和硫酸酯结合物。最常用的酶是从蜗牛Helix pomatia纯化的β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酸酯酶。这种酶天然含有几乎等量的β-葡萄糖醛酸苷酶和硫酸酯酶活性。相比之下，来自E. coli的酶仅含有β-葡萄糖醛酸苷酶，且基本上不含硫酸酯酶活性。

然而，研究人员应保持谨慎：证据表明Helix pomatia提取物被3β-羟基类固醇脱氢酶（HSD）或胆固醇氧化酶活性污染。这可能会干扰那些感兴趣的分析物是3β-HSD底物的研究——如果在同一份样本中分析雄激素，这是一个非常重要的问题。

使用合成的雌激素硫酸酯结合物的实验揭示了另一个关键局限性：仅3-硫酸酯形式被酶水解裂解；17-硫酸酯基团具有抗性。一种有前景的替代方案是使用无水甲醇盐酸对结合物进行溶剂分解——该方法由Tang和Crone于1989年首次发表，随后被多个研究组使用。令人惊讶的是，这种方法似乎尚未应用于老年男性、儿童和绝经前女性的血清和血浆样本。

第二种方法涉及通过质谱法在负离子模式下分析完整的结合物，无需酶水解或衍生化。最近的研究观察到，绝经前女性中总E1浓度范围为61.3至442.1 pg/mL，其中包括平均浓度为244.8 pg/mL的E1硫酸酯。这些较高水平的E1葡萄糖醛酸苷或E1硫酸酯可以通过LC-MS相对容易地定量。血清中的E1硫酸酯可以使用Oasis HLB或弱阴离子交换（WAX）小柱有效提取，并用乙酸铵或氢氧化铵洗脱。

这种完整结合物方法很有前景，但面临一个重大障碍：缺乏真实的雌激素结合物标准品和重稳定同位素类似物用作内标。例如，五种可能的E2硫酸酯（3-硫酸酯、17-硫酸酯、3-硫酸酯17-葡萄糖醛酸苷、3-葡萄糖醛酸苷17-硫酸酯和3,17-双硫酸酯）中，目前商业上仅有一种可用：17β-E2-2,4,6-[²H]₄-3-硫酸酯。

衍生化：通过化学方法提升灵敏度

由于未结合型雌激素在老年男性、儿童和绝经前女性的血液中浓度极低，可靠的测量目前需要衍生化——将化学基团连接到雌激素分子上以提高其被检测的能力。为此目的开发了许多化学衍生化试剂，针对雌激素分子的酚羟基（连接在芳香环上的反应性-OH基团）。

报告的衍生化试剂包括：

• 五氟苄基（PFB）
• 吡啶-3-磺酰基（PS）
• 丹酰基（D）
• 2-吡啶甲酰基（P）
• N-甲基-2-吡啶基（NMP）
• N-甲基烟酰基（NMN）
• 1-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-4,4-二甲基哌嗪基（MPPZ）
• 3-五氟苄基-17β-吡啶鎓（PFBPY）
• 1,2-二甲基咪唑-5-磺酰氯（DMIS）

大多数这些衍生物（PFB、PNB、PS、D和P）在分子上不携带电荷，这限制了它们达到低pg/mL检测限的能力。此外，由于雌激素在化学上彼此相似，这些衍生物往往产生非特异性碎片模式，导致分析特异性较差。

带有永久电荷的衍生物——MP、NMN、MPPZ、PFBPY 和 DMIS——更适合达到 pg/mL 级别的灵敏度。但迄今为止最强大的方法来自作者自己的实验室：NMPS（N-甲基吡啶-3-磺酰基）衍生物。这种预电离衍生化程序将 E2 及其代谢物转化为带永久电荷的分子。其定量下限为进样量 1 μL 时柱上检测限 1.0 fg，能够绝对定量绝经后女性和老年男性血清样本中未结合雌激素的含量。由于衍生化发生在酚羟基处——这是所有雌激素共有的特征——该方法可推广用于测量所有雌激素。

在进行任何高灵敏度分析时，研究人员必须极其谨慎。微量的污染、前一次进样的残留或处理用品带来的背景干扰都可能损害数据质量。使用适当的空白基质（不含雌激素的样本）来检查来自试管、萃取溶剂、衍生化缓冲液以及仪器本身的系统背景尤为重要。

这并非理论上的担忧。在他们自己的工作中，作者意外发现某些玻璃管在酶解过程中会对 E2 信号产生干扰，相当于血清中约 10 pg/mL 的量——这一量级足以使正常 E2 水平低于 5 pg/mL 的人群中的结果完全无效。

色谱分离：区分相似分子

在基于 LC-SRM/MS 的雌激素定量中，由同量异位化合物（质量相同但不是目标雌激素的分子）引起的干扰可能是一个关键问题。这些同量异位干扰可能来自外源性来源（体外）或内源性化合物（体内天然存在），包括其他类固醇。

不幸的是，在串联质谱 (MS/MS) 中碎裂时，雌激素及其代谢物倾向于形成相似的产物离子。例如，当分析丹磺酰衍生物时，产物离子m/z 171（特定的质荷比）通常被选为所有雌激素及其代谢物的定量离子或定性离子，因为它源自丹磺酰基团本身。这种普遍性成为了一个问题：如果 E1 及其代谢物未与 E2 及其代谢物在色谱上分离，可能会导致未结合 E2 的高估——特别是因为未结合 E1 的浓度通常比 E2高 2–3 倍。

更具挑战性的是准确定量儿茶酚雌激素的各个异构体——具体为 2-和 4-OH-E1、2-和 4-OH-E2 及其相应的甲氧基代谢物——因为这些异构体在结构上极其相似，必须通过色谱彼此分离。

研究人员开发了多种策略来解决这一问题：

• 增加峰容量（在一次运行中分离多种化合物的能力）
• 优化梯度洗脱（随时间逐渐改变溶剂组成）
• 使用更小的固定相颗粒——越来越多地使用亚 2 μm 颗粒以提高色谱容量、灵敏度和分析速度。

例如，在作者最近的一项研究中，在吡啶磺酰基衍生化后，12 种雌激素代谢物在 Waters BEH130 C18 柱（150 μm × 100 mm, 1.7 μm, 130 Å）上成功分离，耗时45 分钟。其中包括四种儿茶酚雌激素（4-OHE1、2-OHE1、4-OHE2、2-OHE2）和四种甲氧基雌激素（4-MeOE1、2-MeOE1、4-MeOE2、2-MeOE2）。

基质效应：隐藏的干扰问题

人血清和血浆是复杂的生物混合物。它们含有磷脂和盐等成分，可能会增强或抑制雌激素的电离效率——这意味着它们可能使雌激素信号比应有的更强或更弱。这些“基质效应”被称为基于 LC-MS/MS 的生物样本分析的潜在“阿喀琉斯之踵”。

在一个特别令人困扰的发现中，Keski-Rahkonen 及其同事在由塑料制成的试管或微孔板中进行基于 LC-MS 的检测时遇到了基质效应——这是一种常见的实验室材料，可能引入不可预测的变异性。

一个细微的危险：共洗脱化合物（与目标雌激素同时从色谱柱流出的物质）在监测范围或跃迁中并不总是可见。这种现象被称为“鬼峰”——一种可能无声地破坏结果的不可见干扰。

对于雌激素分析，衍生化后最广泛使用的电离方法是正模式电喷雾电离 (ESI)。然而，有人认为 ESI 比常压化学电离 (APCI) 更容易受到离子抑制的影响。有趣的是，研究表明，与正模式常压光致电离 (APPI) 相比，未衍生化的 E2 在负模式 ESI 中的灵敏度至少提高了 10 倍，并且没有受到共洗脱同量异位化合物的干扰。

评估基质效应有三种一般策略：

1. 柱后 infusion（持续灌注）：在注入空白基质样本的同时，将分析物连续灌注到质谱仪中，以观察信号变化。
2. 萃取后添加：向萃取后的空白基质中加入已知量的分析物，并与纯溶液进行比较。
3. 校准曲线斜率的比较：比较在基质中制备的校准曲线与在纯溶液中制备的校准曲线的斜率。

根据2013年FDA指南，应采取适当措施以确保在整个方法应用过程中不存在基质效应，特别是当生产批次使用的基质与方法验证期间使用的基质不同时。接受标准要求的测量值应在标称值的15%偏差范围内，同时变异系数（CV，衡量结果离散程度的指标）应小于15%。

减少雌激素定量中基质效应的几种方法包括：

• 改进样品前处理程序
• 优化色谱分离
• 使用稳定同位素标记的内标

但即使是内标也需要仔细考虑。研究人员在使用[²H]-类似物内标（氘代）时应谨慎，因为未标记化合物与氘代化合物之间的保留时间偏移可能具有分析学意义——导致分析物和内标的信号受到不同程度的抑制。理想情况下，应使用目标分析物的[¹³C]-含类似物（碳-13标记）作为内标，因为它们在所有色谱条件下都能完全共洗脱。它们还消除了质子性（含水）溶剂中氘交换的可能性。随着亚2 μm颗粒提供的改进色谱分辨率，分析物与其相应的氘代类似物之间可能出现更大的分离度，进一步降低内标的有效性。

临床意义：这对患者意味着什么

这些技术进步不仅仅是学术练习——它们对患者护理有直接影响。对于服用芳香化酶抑制剂治疗乳腺癌的绝经后女性，了解其真实的雌激素水平有助于肿瘤学家确定药物是否有效。对于接受早发性或迟发性青春期评估的儿童，准确的雌激素测量可指导影响生长发育的治疗决策。

对于老年男性，雌激素水平日益被认为与前列腺癌风险和骨骼健康相关。对于绝经后女性，准确评估雌激素暴露对于评估乳腺癌风险和选择适当的预防策略至关重要。

本综述中描述的超灵敏方法——特别是仅需0.1 mL血清的NMPS衍生化方法——能够以前所未有的检测限进行准确测量。这为更好的临床监测和更可靠的关于激素如何影响终生疾病风险的研究打开了大门。能够在单次45分钟的运行中，从一滴血液中测量12种不同的雌激素代谢物，与过去每种雌激素都需要单独进行准确性存疑的免疫测定的时代相比，代表了巨大的进步。

当前方法的局限性

尽管取得了这些进展，但仍存在重大局限性。首先，由于缺乏合适的空白基质——即已知完全不含雌激素的样本——评估雌激素分析的基质效应更为复杂。一般方法是在替代基质（如活性炭处理血清）中制备校准标准和质控样品。然而，活性炭剥离过程可能会去除导致基质效应的真实样本成分，这意味着校准标准可能无法完全代表真实的患者样本。

其次，同位素标记内标——尽管名称如此——可能并不总能完美校正所有来源的变异，特别是如果氘代化合物的保留时间发生偏移，并且与天然雌激素经历不同的电离抑制时。

第三，由于缺乏所有结合形式的真实标准和稳定同位素标准，评估样品间的水解效率仍然困难。测量完整结合物的挫败感因所需参考标准的商业可用性非常有限而加剧：目前仅有一种E2硫酸酯形式可供购买。

最后，用于水解的酶制剂可能会引入混杂因素。常用的Helix pomatia酶含有3β-HSD活性，如果在同一样品中测量雄激素，可能会产生干扰。此外，循环中某些未结合雌激素代谢物的浓度甚至低于这些先进方法的定量下限（LLOQ）。

对研究人员和临床医生的建议

基于其丰富经验，作者为任何进行超灵敏雌激素分析的人提供以下实用建议：

1. 预测试所有耗材：应预先测试试管、试剂和酶，以确保它们不会引入污染或干扰。作者自己发现玻璃管可能产生相当于10 pg/mL的类雌激素信号，这是一个警示案例。
2. 使用MTBE进行液液萃取：与乙醚、己烷和2-甲基丁烷相比，它表现出最完全的测试甾体激素回收率。
3. 选择预离子化衍生化试剂：NMPS衍生物提供永久电荷，实现最高灵敏度（柱上1.0 fg），同时在酚羟基处进行衍生化，使该方法适用于所有雌激素。
4. 使用亚2 μm粒径色谱柱优化色谱分离：这些色谱柱提供必要的分辨率，以分离异构儿茶酚和甲氧基雌激素，否则会导致高估误差。
5. 优先选择¹³C标记的内标：它们在所有色谱条件下与目标分析物完全共洗脱，消除了与氘代标签相关的保留时间偏移问题。
6. 考虑分析完整结合物：这完全避免了水解问题，但目前受限于结合物标准品的可用性。
7. 进行彻底的方法验证：在分析临床样本之前确认检测的灵敏度、特异性和重现性，遵循FDA指南，接受标准为偏差±15%且变异系数低于15%。
8. 注意替代基质的局限性：活性炭处理的血清可能无法完全模拟真实患者样本，因此结果应谨慎解读。

这些建议对于处理来自老年男性、儿童、绝经后女性和服用芳香化酶抑制剂的女性的样本的临床实验室和研究团队尤其相关——在这些人群中，准确、超灵敏的雌激素测量可以直接影响诊断、治疗决策和患者预后。

常见问题解答

为什么在雌激素水平极低的人群中测量如此困难？

在绝经后女性、老年男性和儿童等群体中，雌激素水平可能低于5皮克/毫升，通常比成年人低100倍。如此微小的量难以检测，因为雌激素分子在标准实验室仪器中电离效率低下。化学家使用特殊的化学修饰和极其灵敏的质谱法来准确测量它们。

旧式雌激素测试（免疫测定）存在哪些主要问题？

使用抗体的旧式测试经常与相似分子发生交叉反应，导致读数不准确。结果在不同实验室之间差异很大，且每次测试只能测量一种雌激素。测量多种雌激素代谢产物需要多次单独的测试，使得过程缓慢且在低水平下不可靠。

现代质谱法在雌激素测试中的准确性如何？

使用稳定同位素稀释和液相色谱-质谱法的现代技术被广泛认为是金标准。它们提供更好的特异性、高准确度，并能同时测量多种雌激素。通过加入已知量的标记雌激素，科学家比较信号以计算确切的天然水平，纠正了旧式方法的许多错误。

超灵敏雌激素测试对服用芳香化酶抑制剂的女性意味着什么？

对于服用芳香化酶抑制剂的乳腺癌绝经后女性，准确了解真实雌激素水平有助于肿瘤学家判断药物是否有效。旧式测试可能会错过非常低的水平。超灵敏测试可以从一滴血液中测量雌激素，提供更可靠的治疗效果监测。

为什么对患有青春期相关问题的儿童进行准确的雌激素测量很重要？

在评估早熟或青春期延迟的儿童时，雌激素水平指导影响生长和发育的治疗决策。儿童的雌激素水平可能比成人低约100倍，因此难以测量。先进的方法现在允许从非常小的血液样本中进行准确测量，帮助医生提供适当的护理。

超灵敏雌激素测试需要多少血液？

一些先进方法仅需0.1毫升血清，约一滴血。例如，使用N-甲基吡啶-3-磺酰基衍生化的方法仅用0.1 mL就实现了高灵敏度。早期方法需要0.5 mL。较小的样本需求使测试对儿童和体弱患者更容易进行。

与旧式检测相比，新型雌激素检测有哪些优势？

新型检测可以在一次45分钟的运行中，仅用一滴血测量多达12种不同的雌激素代谢物。它在极低水平下具有更高的准确性，避免了交叉反应性问题，并能提供可靠的结果，以指导乳腺癌、青春期障碍和前列腺癌风险等疾病的治疗。这有助于改善临床监测和研究。

如果您是绝经后女性或雌激素水平极低的老年男性，是否应该就您的雌激素检测结果寻求第二诊疗意见？

是的，第二诊疗意见可能很有价值，因为较旧的免疫测定方法常因交叉反应性而导致读数不准确，且不同实验室之间的结果存在差异。现代质谱法是金标准，能够使用一滴血准确测量低于5 pg/mL的极低雌激素水平。如果您的检测采用的是旧方法，使用先进技术进行第二诊疗意见可能会提供更可靠的结果，这对于监测芳香化酶抑制剂治疗或评估癌症风险非常重要。Diagnostic Detectives Network提供独立的专家第二诊疗意见。

来源信息

这篇面向患者的文章基于《类固醇生物化学与分子生物学杂志》上经过同行评审的研究。

Original article title: Ultra-high sensitivity analysis of estrogens for special populations in serum and plasma by liquid chromatography-mass spectrometry

Authors: Qingqing Wang, Clementina Mesaros, and Ian A. Blair

Publication details: J Steroid Biochem Mol Biol. 2016 September; 162: 70–79. doi:10.1016/j.jsbmb.2016.01.002 (Published in final edited form as an HHS Public Access author manuscript, available in PMC 2017 September 01)

Affiliations: Center of Excellence in Environmental Toxicology and Penn SRP Center, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, PA; Department of Systems Pharmacology and Translational Therapeutics, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania; Department of Pharmacology and Toxicology, Beijing Institute of Radiation Medicine, Beijing, China.

注：本文以患者易懂的语言解释了原始科学综述的技术内容。本文仅供教育目的，不构成医疗建议。关于雌激素检测或激素相关疾病的疑问，请咨询您的医疗保健提供者。